高效液相色谱仪蒸发光散射检测器概述八角帽
高效液相色谱仪蒸发光散射检测器概述
蒸发光散射检测器(ELSD)是基于溶质的光散射性质进行检测,是20世纪80年代出现的高效液相色谱仪检测器。
一、结构:ELSD由雾化器、加热漂移管(溶剂蒸发室)、激光光源和光检测器(光电转换器)等组成。二、工作原理:高效液相色谱柱流出液导入雾化器后,被载气(压缩空气或N2)雾化成微细液滴,液滴通过加热漂移管时,流动相中的溶剂被蒸发掉,只留下溶质,激光束照在溶质颗粒上产生光散射,光收集器收集散射光并通过光电倍增管转变成电信号,散射光强度的对数值与组分浓度的对数值呈线性关系。三、特点:1、优点:(1)较大优点是能检测不含发色团的化合物。(2)属于通用性质量型检测器。因为ELSD是检测光散射变化,散射光强只与溶质颗粒大小和数量有关,与溶质本身的物理和化学性质无关,对各种物质的响应几乎相同。(3)可检测挥发性低于流动相的任何样品。(4)流动相低温雾化和蒸发,对热不稳定和挥发性化合物也有较高的灵敏度。(5)广泛的梯度和溶剂兼容性,无溶剂峰干扰。(6)辅助载气提高了检测灵敏度,保持检测池内清洁,避免污染。(7)高精度雾化和蒸发温度控制,保证高精度检测。(8)可与任何高效液相色谱连接。2、缺点:(1)灵敏度相对较低。(2)不能使用不挥发性的流动相,如磷酸盐。(3)要用雾化气源,典型的是N2。(4)不同色谱条件下的雾化和除溶剂参数需要重新优化。(5)蒸发出的溶剂要引到户外或通风橱中。(6)对挥发性化合物的检测不理想。(7)一般得到的是非线性校正曲线。溶质浓度与峰面积不呈线性关系,分别取自然对数后呈线性关系。(8)某些化合物的检测灵敏度不如其它检测器。四、相关事宜:1、洗脱液需要雾化,雾化气流的纯度和压力影响检测器的信噪比。2、流动相要蒸发掉,不能使用不易挥发的物质调节流动相pH值,可通过调节蒸发温度使比被测物质沸点低的组分蒸发。在不使被测物质蒸发的前提下,温度越高,流动相蒸发越完整,基线越好,信噪比越高。如果被测物质沸点接近或低于流动相的蒸发温度,则无法检测(以100%的水作流动相,沸点比水低的有机物质完整可以用气相色谱进行分离检测)。由于流动相和溶剂蒸发了,使用ELSD得到的色谱图一般没有溶剂峰,梯度洗脱没有折光视差效应,一般不会出现基线漂移。五、应用:适用于无紫外吸收、无电活性、不发荧光和挥发性低于流动相的样品的检测,主要用于糖类、高级脂肪酸、磷脂、维生素、氨基酸、甘油三酯、皂苷和甾体等无紫外吸收或紫外末端吸收的化合物的检测。
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